我在走進實驗室之後，
就已經有人幫我們泡好Sephadex-G50及ammonium acetate pH7.0...XD
太感動了，
所以就在做一點補充，因為生化老師似乎對於製作Gel有著很多的問題，
偏偏我們沒有機會泡到= =
Sephadex-G50要用二次水浸泡隔夜，為什麼？
我聽的原因-有問題可以跟我留個言修正一下= =
每一種凝膠所需要的浸泡時間不同，Sephadex-G50的浸泡是要泡一天
泡過隔夜之後的Sephadex-G50如何去除沒用的顆粒，
用二次水清洗三次時，在到入二次水時，會有一些漂浮小粒，那就是
雜質以及一些破碎掉的顆粒，要撈除-或是用其他的辦法移除= =
此階段務必防止Gel產生氣泡--應該是叫我們慢~慢~的製作...
Sephadex-G50以0.01M ammonium acetate pH7.0之buffer清洗後，
在泡二倍管柱體積的Buffer至隔夜，此過程可以在4度或室溫下操作，
WHY？-I DON'T KNOW-
實驗當天所做的
玻璃管柱在架設前先以二次水潤洗，將過濾的那層membrane泡開，所以
如果玻璃管柱在一開始跑不出液體，這可以當作正常現象= =，
我這組一共用了三支，抓出其中的一支用，一開始很慢，隨著時間的流逝
，速度越來越快，
在用完二次水潤洗後1~2次，
在用buffer潤洗2~3次，本組走捷徑，兩種各一次...
潤洗後的管柱架設時需注意水平，這時再注意即可，不然在潤洗時會將管柱
用的東倒西歪，失去原先意義，
裝填凝膠...Gel做packing時可以先用buffer加入Gel中，可以將凝固的Gel
液態化，本組沒用，所以packing之後的長度硬是少了其他組2公分= =
packing後馬上要用buffer潤洗，洗管壁、不要讓Gel乾掉...拉里拉紮的問題
反正就是要加，不加它就拉倒給你看= =
packing時要注意將管柱打開給他流，死都不要給我產生泡泡= =
用buffer沖洗時，Gel會慢慢下降，可以觀察到他不在下降時，才將管柱改以
捐捐細流的方式一分鐘1CC不到的流速，沖洗兩倍管柱體積，
本組做了123...789...12次...
苦命組的我們，到入混著血清跟葡萄糖的我們，要注意不要讓Gel乾掉，
另外在到入後必須要開始作收集液體的工作，我們收15管每管3mL，
收集好的液體要去測UV Detector，這部機器我還不太會操作就是了= =
用完的液體要回收到管子裡...，接受Molisch的試驗，滴兩滴
滴完後有些管子會...白白的，因為是在牛血清蛋白附近的顏色最..白，所以
推測那是因為蛋白質變異的關係，
加入2mL的濃硫酸，葡萄糖出現的位置，會有紫色圈環的出現，以相對比色的方式
，測出位置。
End~~
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